卵磷脂提纯与检测□马磊    卵磷脂是一种具有广泛用途的天然两性表面活性剂，在饲料加
    卵磷脂是一种具有广泛用途的天然两性表面活性剂，在饲料加工、石油、皮革、涂料、橡胶、医药以及化妆品等领域具有广泛的用途。目前，我国卵磷脂的生产一般是从大豆油、菜籽油等植物油的水化油脚或动物脑以及蛋黄中提取，是多种磷脂成分的混合物。除卵磷脂外，还含有脑磷脂、肌醇磷脂、磷脂酸以及丝氨酸磷脂等，需要进一步提纯才能更好地发挥其功能。    一、提纯方法
    一、提纯方法    目前，卵磷脂的提纯方法主要有以下几种：
    目前，卵磷脂的提纯方法主要有以下几种：    1.分级提浓法  该法是欧美等国家目前工业上普遍采用的提纯方
    1.分级提浓法  该法是欧美等国家目前工业上普遍采用的提纯方法。卵磷脂在醇中的溶解度比脑磷脂和肌醇磷脂高，分级提浓可使卵磷脂含量由15%～20%提高到50%～60%。采用这种方法提纯的卵磷脂，乳化能力大大提高，粘度也明显下降。    2.柱层析法  这也是一种较常用的分离提纯卵磷脂的方法，一般
    2.柱层析法  这也是一种较常用的分离提纯卵磷脂的方法，一般用于实验室等需要精细提纯的地方。可分为吸附柱层析法和离子交换柱层析法两种。吸附柱层析法通常采用氧化铝和硅胶作吸附剂。由于氧化铝对肌醇磷脂、脑磷脂和卵磷脂的吸附能力不同，当用乙醇淋洗层析柱时，被淋洗下来的为卵磷脂，而肌醇磷脂、脑磷脂、中性油和色素等几乎不被淋洗，因而可以得到含量大于95%的卵磷脂产品。离子交换柱层析法是以离子交换树脂为固定相的层析分离方法。将粗大豆磷脂200g溶于2L 90%的热甲醇中，冷却，取上层清液，用2.5L 80%的甲醇溶液稀释，经XAD-2型离子交换柱交换后，柱温保持20℃，用4.65L 90%的甲醇液洗脱，可以得到63.2g卵磷脂产品。    3.超临界流体提取法  该方法多选用二氧化碳作为超临界流体。
    3.超临界流体提取法  该方法多选用二氧化碳作为超临界流体。由于二氧化碳无毒，且具有低温操作的优点，所以特别适用于卵磷脂这种天然产物的分离。根据报道，将1kg粗卵磷脂装入提取罐中，用二氧化碳超临界流体进行提取，可获得580g淡黄色高纯度卵磷脂产品。    4.沉淀法  将粗卵磷脂溶于丙酮溶液中，加入某种金属离子之后
    4.沉淀法  将粗卵磷脂溶于丙酮溶液中，加入某种金属离子之后可使脑磷脂的沉淀率达到91%，卵磷脂的沉淀率为7%，从而使卵磷脂得到有效的分离。    5.膜分离法  该法是根据各分子量不同的组分，通过半透膜的难
    5.膜分离法  该法是根据各分子量不同的组分，通过半透膜的难易程度不同，可将卵磷脂从混合物中分离出来。但该法目前尚不成熟，有待于进一步研究开发。    二、检测方法
    二、检测方法    目前，卵磷脂的质量检测方法主要有以下几种：
    目前，卵磷脂的质量检测方法主要有以下几种：     1.丙酮不溶物称重测定法  该法的优点是简单、易于操作，称
     1.丙酮不溶物称重测定法  该法的优点是简单、易于操作，称量不溶物即可，不足之处是测定值并非卵磷脂的真实测定值。    2.无机磷比色测定法  该法所用仪器价格较低，但由于易受测定
    2.无机磷比色测定法  该法所用仪器价格较低，但由于易受测定物中无机磷含量的影响而使测定值偏高，故应用范围有限。    3.络合光度法  该法是根据磷与钒钼酸盐试剂形成配合物，用紫
    3.络合光度法  该法是根据磷与钒钼酸盐试剂形成配合物，用紫外分光光度法测定配合物来确定终磷含量。具有简便、快速的特点。    4.高效液相法  配制氯仿∶甲醇（体积比）为2∶1的溶液，将
    4.高效液相法  配制氯仿∶甲醇（体积比）为2∶1的溶液，将粗卵磷脂溶解在其中，然后以氯仿∶无水乙醇∶水∶三乙胺（体积比）为30∶34∶8∶35为流动相，用高效液相法进行分离提纯。    5.薄层层析法  以pH值为4.2的正己烷-异丙醇-醋酸盐
    5.薄层层析法  以pH值为4.2的正己烷-异丙醇-醋酸盐（0.2mol/L）缓冲溶液（体积比为8∶8∶1）为流动相，波长为206nm的波数扫描检测，先确定各峰位所代表的组分，再用归一法计算各组分的含量。    6.酶法  利用磷脂酶水解磷脂，然后测定其释放出的产物，于
    6.酶法  利用磷脂酶水解磷脂，然后测定其释放出的产物，于500nm测定吸光度。